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      培養基移種方法

      放大字體  縮小字體 發布日期:2012-08-01  來源:丁香通  瀏覽次數:3259
      核心提示:培養基移種方法
      一、斜面培養基移種技術
      (1)材料
      瓊脂斜面培養基
      經分離培養的平板培養物。
      (2)方法
      ①在瓊脂斜面培養基試管上部標明移種的菌名(或編號)、接種日期、接種者的組別及代號。
      ②左手持長有細菌的平板底,右手持接種環。接種環在火焰上滅菌冷卻后,沾取平板劃線上發育良好的孤立菌落。把平板放回原處,立即用此手取斜面培養基斜持,用右手小指與手掌夾持棉塞,輕輕轉動后撥出棉塞,管口通過火焰滅菌。
      ③將已沾菌的接種環伸入斜面培養基的管底部的凝固水,沿斜面培養基的表面從底向上劃一直線,然后再從底部向上劃連續曲折線;也可不劃直線只劃曲折線。取出接種環,管口通過火焰滅菌,塞好棉塞,放試管架上,接種環火焰滅菌后放下。
      向斜面培養基上移種的細菌如果是生長在斜面培養基上的,或是生長在液體培養基中的,則用左手同時斜持菌種管和斜面培養基兩個管,右手無名指、小指手掌同時拔起夾持二個棉塞。管口及接種環先經火焰滅菌后,從菌種管取菌立即移種到斜面上,塞好棉塞,接種環火焰滅菌后放下。然后將斜面培養基放37℃恒溫箱中培養24h。結果斜面表面形成菌苔。
      二、液體培養基移種技術
      用于純種細菌的增菌及觀察細菌在液體環境中的生長特征(混濁生長,表面生長或沉淀生長)
      (1)材料
      肉湯培養基
      斜面培養物(大腸埃希菌、化膿性鏈球菌、枯草芽胞桿菌)
      (2)方法
      ①取接種環在火焰上灼燒滅菌、冷卻。
      ②以“雙管移植法”左手持細菌斜面培養物和肉湯培養基兩支試管,右手持接種環,按無菌操作法取少量細菌,將沾菌的接種環在斜傾的接近液面的管壁上輕輕涂抹研勻,試管直立使沾附在管壁上的細菌沒入液體中,接種后放37℃恒溫箱中培養。
      (3)結果
      ①渾濁生長大腸埃希菌菌液呈均勻混濁,管底有少量沉淀。
      ②沉淀生長化膿性鏈球菌菌液管底有沉淀,菌液無明顯渾濁。
      ③菌膜生長枯草芽胞桿菌菌液表面形成膜狀物。
      三、半固體培養基移種技術
      用于保存菌種及間接檢查細菌有無動力。
      (1)材料
      半固體培養基。
      細菌斜面培養物。
      (2)方法
      ①將接種針經火焰滅菌冷卻后,從斜面培養物表面沾取細菌。
      ②用無菌法穿刺接種,將接種針刺入半固體培養基正中央,深度達距管底0.5cm處停止,然后循原路退出。注意在刺入及拔出時要保持接種針不向穿刺線外擺動。
      ③試管口通過火焰滅菌,塞上棉塞。接種針經火焰滅菌。培養物放37℃恒溫箱中培養。
      (3)結果:有動力的細菌呈擴散生長,無動力的細菌沿穿刺線生長。
      編輯:songjiajie2010

       
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      關鍵詞: 培養基 移種
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